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制備用于高通量細(xì)胞分析的貼壁細(xì)胞的兩步法操作方法
沙特KAUST大學(xué)的科學(xué)家Mandeep Kaur和Luke Esau開(kāi)發(fā)了一種簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、有效的制備用于高通量細(xì)胞分析的貼壁細(xì)胞的兩步法操作方法。生長(zhǎng)在微孔板上的貼壁細(xì)胞,加入2.9mM EDTA (pH6.14) 到含有細(xì)胞培養(yǎng)液的微孔中直接使細(xì)胞離壁,染色后在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析即可。該操作方法省去了清洗、離心和板之間的轉(zhuǎn)移,降低了常規(guī)多步驟制備的細(xì)胞損失。該方法采用六種貼壁細(xì)胞、四種商品化染料、兩種抗體在兩個(gè)不同流式細(xì)胞儀上進(jìn)行了驗(yàn)證。這個(gè)方法可以用于分析細(xì)胞凋亡、線粒體膜電位、活性氧化物種和細(xì)胞的吞噬等。
原文:
Mandeep Kaur and Luke Esau, Two-step protocol for preparing adherent cells for high-throughput flow cytometry, BioTechniques 59:119-126 (September 2015)